肝纤维化是一种慢性肝脏疾病，由多种刺激因素引起，其特征是细胞外基质（ECM）蛋白过度产生，导致瘢痕组织形成，进而影响肝脏功能，最终可能发展为肝硬化。在肝纤维化进展过程中，肝星状细胞（HSCs）的激活起着关键作用，其会过度产生包括I型胶原、III 型胶原和α -平滑肌肌动蛋白（α-SMA）等ECM蛋白，这些蛋白被视为纤维化标志物，并参与一系列炎症和纤维化过程。因此，减少HSCs的激活、诱导其凋亡或降低ECM蛋白的积累被认为是抗纤维化或逆转肝纤维化的方法。

转化生长因子TGF-β的失调是器官纤维化发生机制的主要原因。在CCl₄诱导的肝纤维化小鼠模型及TGF-β₁刺激的HSC-T6细胞中，牛樟芝菌丝水提物CCM111通过下调TGF-β/Smad信号通路，显著降低磷酸化Smad2/Smad3、TGF-β₁本身以及纤维化标志物α-SMA和MMP-2的表达，并联合抑制Wnt和STAT3通路及多种ECM蛋白和炎症相关基因的表达，从而减轻肝纤维化的严重程度。

牛樟芝中马来酸/琥珀酸衍生物Antrodin B 可在TGF-β₁诱导的HSC-T6细胞及早期肝纤维化小鼠模型中显著降低α-SMA表达，抑制Col1A2启动子活性并减少胶原蛋白I的沉积，同时减弱p-Smad2/3及Smad4的核内累积；这些结果表明Antrodin B主要通过抑制TGF-β₁/Smad2/3-Sp1信号轴来阻断HSC激活和ECM过度积累。

牛樟芝中的成分具有抗炎特性，可降低炎症因子的表达。TNF-α（肿瘤坏死因子-α）是一种促炎细胞因子，其高表达表示肝脏炎症反应严重。在LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞中，CCM111可同时抑制NF-κB和STAT3通路活化，显著降低TNF-α等多种促炎细胞因子的分泌，并下调iNOS和COX-2蛋白表达，从而减少NO生成和炎症反应。iNOS介导的NO过量生成被认为在肝炎和肝纤维化相关的慢性炎症中起重要作用，因此这类抑制TNF-α/iNOS轴的作用从机制上支持牛樟芝在缓解肝脏炎症和延缓纤维化进展方面的潜在价值。

组织病理学检查：在CCl₄诱导的肝纤维化小鼠中，牛樟芝水提取物CCM111给药显著减少胶原沉积和假小叶形成，表明CCM111可缓解肝脏炎症和纤维化进展：

①抑制TGF-β通路：CCM111处理显著降低了诱导的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和基质金属蛋白酶2（MMP2）的表达，以及磷酸化Smad2、Smad3和TGF-β1的水平，表明CCM111通过抑制TGF-β通路抑制肝纤维化进展。

②抑制炎症和纤维化相关基因表达：通过下一代测序（NGS）分析发现，CCl₄诱导显著上调多种与TGF-β信号、细胞因子和细胞外基质（ECM）蛋白相关的基因，而CCM111可部分逆转这些变化；同时，CCM111下调Wnt通路和STAT3通路若干下游基因的表达，提示其通过协同抑制TGF-β、Wnt和STAT3通路来同时减轻肝纤维化和炎症反应。

③抑制TGF-β1诱导的通路激活和纤维化标志物表达：CCM111显著抑制了TGF-β1介导的磷酸化Smad2、Smad3、α-SMA和MMP2的表达，且呈剂量和时间依赖性。

④抑制TGF-β1诱导的STAT3和Wnt通路激活：同一HSC-T6体系中，CCM111还降低了TGF-β₁介导的STAT3磷酸化水平及β-连环蛋白的核转位，进一步削弱STAT3和Wnt/β-catenin通路活化，从而抑制HSC持续激活并减缓肝纤维化进展。

在正常情况下，静态的肝星状细胞（HSCs）不表达α-SMA（α-平滑肌肌动蛋白），但肝脏受损时，HSCs被激活并转化为肌成纤维细胞，表达α-SMA，分泌大量胶原蛋白，导致肝脏纤维化。其中，转化生长因子-β1（TGF-β1）在HSCs激活过程中起关键作用。牛樟芝DOW-AC能显著抑制α-SMA蛋白表达，减少HSCs的激活，进而抑制胶原蛋白的分泌和积累，有效减轻肝脏纤维化程度。

图4.3牛樟芝水提取物CCM111抗肝纤维化机制

图4.4牛樟芝活性成分阻断肝纤维化中TGF-β1信号通路机制

案例：肝纤四项的改善（自2016年10月开始服用）：HA、PIIINP、CIV三项在服用3个月后数值下降，其中PIIINP、CIV两项在18个月后恢复至正常，提示肝脏纤维化问题得到好转。

表4.1某患者服用牛樟芝后肝纤维化四项指标随时间的变化

附注：肝纤四项包括：透明质酸（HA，Hyaluronic Acid）、Ⅲ型前胶原氨基端肽（PIIINP）、Ⅳ型胶原（CIV，Collagen Type IV）、层粘连蛋白（LN，Laminin）。

透明质酸（HA, Hyaluronic Acid）：肝纤维化/肝硬化時，水平升高反映肝细胞外基质合成增加及肝脏清除能力下降，尤其在晚期纤维化或肝硬化时显著升高。

预后判断：持续高水平提示纤维化进展风险高。

Ⅲ型前胶原氨基端肽（PIIINP）：

早期纤维化：升高提示肝星状细胞活化及纤维化早期活动。动态监测可用于评估抗纤维化治疗的效果。

局限性：急性肝炎或炎症时可能短暂升高，需结合其他指标。

Ⅳ型胶原（CIV, Collagen Type IV）：肝纤维化时基底膜破坏，CIV释放入血。升高提示纤维化进展至中晚期，可能早于HA和PIIINP出现异常。

层粘连蛋白（LN, Laminin）：门静脉高压：升高与门脉高压相关，提示纤维化进展至肝硬化阶段。

预后：显著升高可能预示食管静脉曲张等并发症风险。